Comment extraire l'ADN

L'ADN ou l'acide désoxyribonucléique est la molécule qui code l'information génétique dans la plupart des organismes vivants. Certaines bactéries utilisent l'ARN pour leur code génétique, mais tout autre organisme vivant fonctionnera comme source d'ADN pour ce projet.

Matériaux d'extraction d'ADN

Bien que vous puissiez utiliser n'importe quelle source d'ADN, certaines fonctionnent particulièrement bien. Les pois, comme les pois verts cassés séchés, sont un excellent choix. Les feuilles d'épinards, les fraises, le foie de poulet et les bananes sont d'autres options. N'utilisez pas l'ADN de personnes vivantes ou d'animaux de compagnie, par simple éthique.

• 100 ml (1/2 tasse) d'une source d'ADN
• 1 ml (⅛ cuillère à café) sel de table, NaCl
• 200 ml (1 tasse) d'eau froide
• enzymes pour dénaturer les protéines (par exemple, attendrisseur à viande, jus d'ananas frais ou solution de nettoyage pour lentilles de contact)
• 30 ml (2 cuillères à soupe) de détergent à vaisselle liquide
• 70 à 90% d'alcool à friction ou autre alcool isopropylique ou éthylique
• mixeur
• passoire
• tasse ou bol
• tubes à essai
• pailles ou brochettes en bois

Effectuer l'extraction d'ADN

1. Mélanger ensemble 100 ml de source d'ADN, 1 ml de sel et 200 ml d'eau froide. Cela prend environ 15 secondes sur un réglage élevé. Vous visez un mélange de soupe homogène. Le mélangeur brise les cellules, libérant l'ADN stocké à l'intérieur.
2. Versez le liquide à travers une passoire dans un autre récipient. Votre objectif est d'éliminer les grosses particules solides. Gardez le liquide; jeter les solides.
3. Ajoutez 30 ml de détergent liquide au liquide. Remuez ou tourbillonnez le liquide pour le mélanger. Laissez cette solution réagir pendant 5 à 10 minutes avant de passer à l'étape suivante.
4. Ajouter une petite pincée de attendrisseur à viande ou une giclée de jus d'ananas ou une solution nettoyante pour lentilles de contact dans chaque flacon ou tube. Agitez doucement le contenu pour incorporer l'enzyme. Une agitation intense brisera l'ADN et rendra la vision plus difficile dans le récipient.
5. Inclinez chaque tube et versez de l'alcool sur le côté de chaque verre ou plastique pour former une couche flottante sur le liquide. L'alcool est moins dense que l'eau, il flottera donc sur le liquide, mais vous ne voulez pas le verser dans les tubes car il se mélangera. Si vous examinez l'interface entre l'alcool et chaque échantillon, vous devriez voir une masse filandreuse blanche. C'est l'ADN!
6. Utilisez une brochette en bois ou une paille pour capturer et collecter l'ADN de chaque tube. Vous pouvez examiner l'ADN à l'aide d'un microscope ou d'une loupe ou le placer dans un petit récipient d'alcool pour le conserver.

Comment ça fonctionne

La première étape consiste à choisir une source contenant beaucoup d'ADN. Bien que vous puissiez utiliser l'ADN de n'importe où, les sources riches en ADN donneront plus de produit à la fin. Le génome humain est diploïde, ce qui signifie qu'il contient deux copies de chaque molécule d'ADN. De nombreuses plantes contiennent plusieurs copies de leur matériel génétique. Par exemple, les fraises sont octoploïdes et contiennent 8 copies de chaque chromosome.

Le mélange de l'échantillon brise les cellules afin que vous puissiez séparer l'ADN des autres molécules. Le sel et le détergent agissent pour éliminer les protéines normalement liées à l'ADN. Le détergent sépare également les lipides (graisses) de l'échantillon. Les enzymes sont utilisées pour couper l'ADN. Pourquoi voudriez-vous le couper? L'ADN est plié et enroulé autour des protéines, il doit donc être libéré avant de pouvoir être isolé.

Après avoir terminé ces étapes, l'ADN est séparé des autres constituants cellulaires, mais vous devez toujours le retirer de la solution. C'est là que l'alcool entre en jeu. Les autres molécules de l'échantillon se dissoudront dans l'alcool, mais pas l'ADN. Lorsque vous versez de l'alcool (le plus froid sera le mieux) sur la solution, la molécule d'ADN précipite pour que vous puissiez la collecter.

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