Comment strier une culture bactérienne

Les stries de culture bactérienne permettent aux bactéries de se reproduire sur un milieu de culture dans un environnement contrôlé. Le processus consiste à répandre des bactéries sur une plaque de gélose et à leur permettre d'incuber à une certaine température pendant une période de temps. Les stries bactériennes peuvent être utilisées pour identifier et isoler les colonies bactériennes pures d'une population mixte. Les microbiologistes utilisent des méthodes de stries de culture bactérienne et microbienne pour identifier les micro-organismes et diagnostiquer l'infection.

De quoi as-tu besoin:

  • Plaque de culture avec des micro-organismes
  • Boucle d'inoculation ou cure-dents stériles
  • Plaques d'agar
  • Brûleur Bunsen ou autre instrument produisant une flamme
  • Gants
  • Ruban

Ici'spectacle:

  1. Tout en portant des gants, stérilisez une boucle d'inoculation en la plaçant à un angle sur une flamme. La boucle doit devenir orange avant de la retirer de la flamme. Un cure-dent stérile peut remplacer la boucle d'inoculation. Faire ne pas placer des cure-dents sur une flamme.
  2. Retirer le couvercle d'une plaque de culture contenant le micro-organisme souhaité.
  3. Refroidir la boucle d'inoculation en la poignardant dans la gélose dans un endroit qui ne contient pas de colonie bactérienne.
  4. Choisissez une colonie et grattez un peu des bactéries à l'aide de la boucle. Assurez-vous de fermer le couvercle.
  5. À l'aide d'une nouvelle plaque d'agar, soulevez le couvercle juste assez pour insérer la boucle.
  6. Streak la boucle contenant les bactéries à l'extrémité supérieure de la plaque d'agar se déplaçant dans un motif horizontal en zig-zag jusqu'à ce que 1/3 de la plaque soit couverte.
  7. Stérilisez à nouveau la boucle dans la flamme et refroidissez-la au bord de la gélose à l'écart des bactéries dans la plaque que vous venez de strier.
  8. Faites pivoter la plaque d'environ 60 degrés et répartissez les bactéries de la fin de la première séquence dans une deuxième zone en utilisant le même mouvement à l'étape 6.
  9. Stérilisez à nouveau la boucle en utilisant la procédure de l'étape 7.
  10. Faites pivoter la plaque d'environ 60 degrés et répartissez les bactéries de la fin de la deuxième séquence dans une nouvelle zone dans le même schéma.
  11. Stérilisez à nouveau la boucle.
  12. Remettez le couvercle en place et fixez-le avec du ruban adhésif. Inverser la plaque et incuber une nuit à 37 degrés Celsius (98,6 degrés Fahrenheit).
  13. Vous devriez voir des cellules bactériennes se développer le long des stries et dans des zones isolées.

Conseils:

  1. Lors de la stérilisation de la boucle d'inoculation, assurez-vous que toute la boucle devient orange avant de l'utiliser sur les plaques d'agar.
  2. Lorsque vous rayez l'agar avec la boucle, assurez-vous de garder la boucle horizontale et de ne strier que la surface de l'agar.
  3. Si vous utilisez des cure-dents stériles, utilisez un nouveau cure-dent lors de chaque nouvelle séquence. Jetez tous les cure-dents usagés.

Sécurité:

Lors de la croissance de colonies bactériennes, vous aurez affaire à des millions de bactéries. Il est important que vous suiviez toutes les règles de sécurité du laboratoire. Des précautions doivent être prises pour vous assurer de ne pas inhaler, ingérer ou permettre à ces germes de toucher votre peau. Les plaques bactériennes doivent être maintenues fermées et fixées avec du ruban adhésif pendant l'incubation. Toutes les plaques bactériennes indésirables doivent être éliminées correctement en les plaçant dans un autoclave pour tuer les bactéries avant de les jeter. De l'eau de Javel peut également être versée sur les colonies bactériennes pour les détruire.