Comment le test de Kastle-Meyer détecte-t-il le sang?

Le test de Kastle-Meyer est une méthode médico-légale peu coûteuse, facile et fiable pour détecter la présence de sang. Voici comment effectuer le test.

Matériaux

• Solution Kastle-Meyer
• 70 pour cent d'éthanol
• eau distillée ou déionisée
• 3 pour cent de peroxyde d'hydrogène
• cotons-tiges
• compte-gouttes ou pipette
• un échantillon de sang séché

Effectuer les étapes du test sanguin de Kastle-Meyer

1. Humidifiez un tampon avec de l'eau et touchez-le à un échantillon de sang séché. Vous n'avez pas besoin de frotter fort ou d'enduire l'écouvillon avec l'échantillon. Vous n'avez besoin que d'une petite quantité.
2. Ajouter une goutte ou deux d'éthanol à 70 pour cent à l'écouvillon. Vous n'avez pas besoin de tremper l'écouvillon. L'alcool ne participe pas à la réaction, mais il sert à exposer l'hémoglobine dans le sang afin qu'il puisse réagir plus pleinement pour augmenter la sensibilité du test.
3. Ajoutez une ou deux gouttes de la solution Kastle-Meyer. Il s'agit d'une solution de phénolphtaléine, qui doit être incolore ou jaune pâle. Si la solution est rose ou devient rose lorsqu'elle est ajoutée à l'écouvillon, la solution est ancienne ou oxydée et le test ne fonctionnera pas. L'écouvillon doit être incolore ou pâle à ce stade. S'il a changé de couleur, recommencez avec une solution fraîche de Kastle-Meyer.
4. Ajoutez une ou deux gouttes de solution de peroxyde d'hydrogène. Si l'écouvillon devient rose immédiatement, c'est un test positif pour le sang. Si la couleur ne change pas, l'échantillon ne contient pas de quantité détectable de sang. Notez que l'écouvillon changera de couleur, devenant rose après environ 30 secondes, même en l'absence de sang. Ceci est le résultat du peroxyde d'hydrogène oxydant la phénolphtaléine dans la solution indicatrice.

Méthode alternative

Plutôt que de mouiller l'écouvillon avec de l'eau, le test peut être effectué en humidifiant l'écouvillon avec la solution d'alcool. Le reste de la procédure reste le même. Il s'agit d'un test non destructif qui laisse l'échantillon dans un état tel qu'il peut être analysé à l'aide d'autres méthodes. Dans la pratique, il est plus courant de prélever un nouvel échantillon pour des tests supplémentaires.

Sensibilité et limites du test

Le test sanguin Kastle-Meyer est un test extrêmement sensible, capable de détecter des dilutions sanguines aussi faibles que 1:10^sept. Si le résultat du test est négatif, c'est une preuve raisonnable que l'hème (un ingrédient dans tout le sang) est absent dans l'échantillon. Cependant, le test donnera un résultat faussement positif en présence d'un agent oxydant dans l'échantillon. Les exemples incluent les peroxydases naturellement présentes dans le chou-fleur ou le brocoli. En outre, il est important de noter que le test ne fait pas de différence entre les molécules d'hème de différentes espèces. Un test distinct est nécessaire pour déterminer si le sang est d'origine humaine ou animale.

Fonctionnement du test

La solution de Kastle-Meyer est une solution d'indication de phénolphtaléine qui a été réduite, généralement en la faisant réagir avec du zinc en poudre. La base du test est que l'activité de type peroxydase de l'hémoglobine dans le sang catalyse l'oxydation de la phénolphtaléine réduite incolore en phénolphtaléine rose vif.