Comment faire une solution tampon Tris pour une utilisation médicale ou en laboratoire

Les solutions tampons sont des liquides à base d'eau qui contiennent à la fois un acide faible et sa base conjuguée. En raison de leur chimie, les solutions tampons peuvent maintenir le pH (acidité) à un niveau presque constant même en cas de changements chimiques. Les systèmes tampons existent dans la nature, mais ils sont également extrêmement utiles en chimie.

Utilisations des solutions tampons

Dans les systèmes organiques, les solutions tampons naturelles maintiennent le pH à un niveau constant, ce qui permet aux réactions biochimiques de se produire sans nuire à l'organisme. Lorsque les biologistes étudient les processus biologiques, ils doivent maintenir le même pH constant; pour ce faire, ils ont utilisé des solutions tampons préparées. Les solutions tampons ont été décrites pour la première fois en 1966; plusieurs des mêmes tampons sont utilisés aujourd'hui.  

Pour être utiles, les tampons biologiques doivent répondre à plusieurs critères. Plus précisément, ils doivent être solubles dans l'eau mais non solubles dans les solvants organiques. Ils ne devraient pas pouvoir traverser les membranes cellulaires. De plus, ils doivent être non toxiques, inertes et stables tout au long des expériences pour lesquelles ils sont utilisés.

Les solutions tampons se trouvent naturellement dans le plasma sanguin, c'est pourquoi le sang maintient un pH constant entre 7,35 et 7,45. Les solutions tampons sont également utilisées dans:

• processus de fermentation
• tissus mourants
• analyse chimique
• étalonnage des pH-mètres
• Extraction d'ADN

Qu'est-ce que la solution tampon Tris?

Tris est l'abréviation de tris (hydroxyméthyl) aminométhane, un composé chimique qui est souvent utilisé dans une solution saline car il est isotonique et non toxique. Parce qu'il a un Tris a un pKa de 8,1 et un pH compris entre 7 et 9, les solutions tampons Tris sont également couramment utilisées dans une gamme d'analyses chimiques et de procédures, y compris l'extraction d'ADN. Il est important de savoir que le pH dans la solution tampon tris change avec la température de la solution.

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Comment préparer le tampon Tris

Il est facile de trouver une solution tampon tris disponible dans le commerce, mais il est possible de la fabriquer vous-même avec l'équipement approprié.

Matériaux:

Calculez la quantité de chaque article dont vous avez besoin en fonction de la concentration molaire de la solution que vous souhaitez et de la quantité de tampon dont vous avez besoin.

• tris (hydroxyméthyl) aminométhane 
• eau désionisée distillée
• HCl

Procédure:

1. Commencez par déterminer quelle concentration (molarité) et volume de tampon Tris vous voulez faire. Par exemple, la solution tampon Tris utilisée pour la solution saline varie de 10 à 100 mM. Une fois que vous avez décidé de ce que vous faites, calculez le nombre de moles de Tris qui sont nécessaires en multipliant la concentration molaire de tampon par le volume du tampon en cours de fabrication. (moles de Tris = mol / L x L)
2. Ensuite, déterminez le nombre de grammes de Tris en multipliant le nombre de moles par le poids moléculaire de Tris (121,14 g / mol).  grammes de Tris = (moles) x (121,14 g / mol)
3. Dissoudre le Tris dans l'eau distillée désionisée, 1/3 à 1/2 du volume final souhaité.
4. Mélanger dans HCl (par exemple, HCl 1 M) jusqu'à ce que le pH-mètre vous donne le pH souhaité pour votre solution tampon Tris.
5. Diluer le tampon avec de l'eau pour atteindre le volume final de solution souhaité.

Une fois la solution préparée, elle peut être conservée pendant des mois dans un endroit stérile à température ambiante. La longue durée de conservation de la solution tampon Tris est possible car la solution ne contient aucune protéine.